Alpha 突触核蛋白A53T 突变型PFF

Alpha 突触核蛋白 A53T PFFs (目录号 SPR-326) 在培养的原代大鼠神经元中诱导丝氨酸 129 磷酸化

培养基中 1 µg/ml 超声处理的 StressMarq’s Alpha 突触核蛋白 A53T 突变 PFF（目录号 SPR-326）

可诱导原代大鼠神经元中 Ser129 磷酸化。

来自：Associate Professor Rehana Leak, Duquesne University, USA

氨基末端乙酰化的 Alpha 突触核蛋白PFF

来自: University of Toronto, Canada

来自: StressMarq Biosesciences; internal results

Alpha 突触核蛋白寡聚体

与不溶性原纤维相比，寡聚体是小的（25-30 nm）球状可溶结构。它们是与帕金森病相关的有毒聚集体，在结构上与原纤维不同。

负染色（铀酰酸）的电子显微镜图显示了Alpha 突触核蛋白的寡聚体结构，左侧为用多巴胺处理的alpha 突触核蛋白寡聚

来源：EM performed at U. of  British Columbia	来源：EM performed at U.  of British Columbi	来源：EM performed at  University of Toronto

Alpha 突触核蛋白毒性

100 µg/ml 的各种 α-突触核蛋白对原代小鼠皮质神经元的毒性测试，一式四份：

孵育 24 小时后进行 MTT 测定（左）和 LDH 释放测定（右）。

来源: performed at QPS Austria GmbH

ATTO 594 标记的原纤维也有聚集活性

ATTO594 标记的 (目录号 SPR-322-A594) 人 1型 Alpha 突触核蛋白PFF

ATTO 594 PFF 诱发人神经元中的病理现象

神经元培养试剂盒: 预分化的混合神经元 (血细胞iPSC;) 每孔4000个细胞。

细胞染色:

      上: pSer129 α –syn 染色 (Alpha 突触核蛋白抗体, StressMarq 目录号 SMC-600), 绿色

      中: ATTO 594 染色, 红色

      下: 以上两者复合图, 外加肌动蛋白 (粉色) 和DNA (蓝色) 染色.

来源: ICC human iPSCs; CellState Biosesciences, USA

ATTO-594 PFF 诱导大鼠肠神经元中Alpha 突触核蛋白聚集

Northeastern大学的研究人员使用 StressMarq 的 ATTO 594 标记的 Alpha 突触核蛋白 PFF（目录号 SPR-322-A594）来研究不同剂量下大鼠肠神经元对荧光标记的 PFF的吸收和保留。将前体原纤维 PD 模型应用于丁酸盐和脂多糖的共同给药组，以模拟局部肠道微生物组的影响。

● 大鼠肠道和皮质神经元中 PFF 的摄取和保留具有显著的剂量依赖性

● 加入了PFF 的肠神经系统 (ENS) 培养物的生长锥形态发生变化

●  ENS 克服了 PFF 剂量以保持稳定的活性

(A) 理论上的前体原纤维 (PFF) 毒性进展的图示，从 PFF 的引入到神经元的摄取以及内源 α-突触核蛋白 (a-Syn) 的进一步聚集。 (B) 实验设计的时间表。 在整个实验期间，每 2-3 天喂养一次培养物。 (C) 为实验分离出来的神经元群（皮质和肠）的代表性图像，方框圈出的对应的解剖位置。

注: Bindas et al. https://doi.org/10.1038/s41598-022-26543-x

动态学稳定的Alpha 突触核蛋白寡聚体

动态学稳定的alpha-突触核蛋白 寡聚体的电镜图 (目录号 SPR-484）	(B)和(C)分别是冻融一次后的和37℃孵育两周后 的尺寸排阻色谱(SEC)。在峰值处，90%SPR-484 在冻融后37℃下孵育两周仍然稳定于寡聚体状态。

动态学稳定的 Alpha 突触核蛋白寡聚体 (目录号 SPR-484) 稳定于球状的寡聚体结构

动态学稳定的 Alpha 突触核蛋白寡聚体

Tau-352 (胚胎 0N3R) & Alpha 突触核蛋白共聚集体原纤维

Tau-352 和 Alpha 突触核蛋白共聚体原纤维  （目录号 SPR-494）的电镜图	胚胎 Tau-352 0N3R & Alpha 突触核蛋白共聚集体 原纤维的体外聚集硫磺素T检测
来源: University of Toronto, Canada	来源: StressMarq Lab; internal results

Tau-441 (2N4R) & Alpha 突触核蛋白共聚集体原纤维

Tau-441 和 Alpha 突触核蛋白共聚集体原纤维  (目录号 SPR-495) 的电镜图	Tau 2N4R & Alpha 突触核蛋白共聚集体原纤维 的体外聚集硫磺素T检测
来自: University of Toronto, Canada	来自: StressMarq Lab; internal results

Tau & Alpha 突触核蛋白共聚集体原纤维的免疫-TEM

原纤维被吸附到碳涂层铜网格上。 6nm（asyn）和 12nm（tau）信号同时出现在共聚集体原纤维样品的同一原纤维链中(目录号 SPR-494, SPR-495)，并且在对照 α-突触核蛋白或 tau 原纤维中未观察到抗体交叉反应。

网格用含1% BSA 和 0.1% Tween-20 的 PBS 封闭，洗涤，然后依次在封闭缓冲液中用 20 µg/mL 的一抗孵育，洗涤，再在封闭缓冲液中用 20 µg/mL 的二抗孵育，洗涤并用2% 乙酸双氧铀作为负染色。

StressMarq Alpha 突触核蛋白发表文献

● 人 Alpha 突触核蛋白前体原纤维 (1型)，目录号 SPR-322

1. Deciphering the role of hsp110 chaperones in diseases of protein misfolding. Yakubu, U. M. (2021) PhD Thesis, University of Texas.

2. Suppression of aggregate and amyloid formation by a novel intrinsically disordered region in metazoan Hsp110 chaperones. Yakubu, U.M. Morano, K.A. (2021) J Biol Chem Jan-Jun 2021;296:100567.

3. Design, Synthesis and Chemically Engineered Graphene Quantum Dot Applications: Contrast Agent for MR Imaging and Targeted Therapeutics on Parkinson’s Treatment. Poonkuzhali, K. et al. (2022) SSRN 4056733.

4. Rational Generation of Monoclonal Antibodies Selective for Pathogenic Forms of Alpha-Synuclein. Gibbs, E. et al. (2022) Biomedicines 10,2168. 

5. LRP1 is a neuronal receptor for α-synuclein uptake and spread. Chen, K. et al. (2022) Molecular Neurodegeneration 17(1):57. 

6. Granulovacuolar degeneration bodies are independently induced by tau and α-synuclein pathology. Jorge-Oliva, M. et al. (2022) Alzheimer’s Research and Therapy (14)187.

7. Disrupting the α-synuclein- ESCRT interaction with a peptide inhibitor mitigates neurodegeneration in preclinical models of Parkinson’s disease. Nim, S. et al. (2023) Nat Commun 14, 2150.

● 小鼠 Alpha 突触核蛋白前体原纤维 (1型)，目录号 SPR-324

1. The SUMO conjugase Ubc9 protects Dopaminergic cells from cytotoxicity and enhances the stability of α-synuclein in Parkinson’s disease models. Verma, D.K. et al. (2020) eNeuro 0134-20.2020.

2. Alpha-Synuclein Preformed Fibrils Induce Cellular Senescence in Parkinson’s Disease Models. Verma, D.K. et al. (2021) Cells 10, 1694.

3. Heat Shock Protein 70 as a Sex-Skewed Regulator of α-Synucleinopathy.Bhatia, T. N. et al.  (2021) Neurotherapeutics Oct;18(4):2541-2564.

4. Domain-Independent Inhibition of CBP/p300 Attenuates α-Synuclein Aggregation. Hlushchuk, I. et al. (2021) ACS Chemical Neuroscience Jul 7;12(13):2273-2279.

5. A Novel NOX Inhibitor Treatment Attenuates Parkinson’s Disease-Related Pathology in 小鼠 Models. Ghosh, A. A. et al. (2022) Int J Mol Sci 23, 4262.

6. Cell Culture Media, Unlike the Presence of Insulin, Affect α-Synuclein Aggregation in Dopaminergic Neurons. Hlushchuk, I. et al. (2022) Biomolecules 12, 563.

7. Targeted degradation of ⍺-synuclein aggregates in Parkinson’s disease using the AUTOTAC technology. Lee, J. et al. (2023) Mol Neurodegeneration 18, 41.

● 人 Alpha 突触核蛋白前体原纤维: ATTO-594 (1型)，目录号 SPR-322-A594

1. Aggregation of alpha-synuclein in enteric neurons does not impact function in vitro. Bindas, A.J. et al. (2022) Sci Rep 12, 22211.

● 人 Alpha 突触核蛋白A53T 突变型前体原纤维 (1型)，目录号 SPR-326

1. Environmental enrichment reduced pathological α-Synuclein accumulation by restoring LAMP1 via Reelin in early stage of Parkinson’s disease. Cho, E. (2021) PhD Thesis, Yonsei University.

2. Reelin Alleviates Mesenchymal Stem Cell Senescence and Reduces Pathological α-Synuclein Expression in an In Vitro Model of Parkinson’s Disease. Cho, E. (2021) Genes 12, 1066.

3. Reelin protects against pathological alpha-synuclein accumulation and dopaminergic neurodegeneration after environmental enrichment in Parkinson’s disease. Cho, E. et al. (2022) Neurobiology of Disease 175:105898.

● 人 Alpha 突触核蛋白前体原纤维 (2型), 目录号 SPR-317

1. Directed Evolution of Antibodies Against Complex Targets. Desai, A. (2021) PhD Thesis, University of Michigan.

2. Observation of α-Synuclein Preformed Fibrils Interacting with SH-SY5Y Neuroblastoma Cell Membranes Using Scanning Ion Conductance Microscopy. Feng, C. et al. (2022) ACS Chemical Neuroscience. DOI: 101021/acschemneuro.2c00478.

3. Flow cytometric isolation of drug-like conformational antibodies specific for amyloid fibrils. Desai, A. et al.(2023) bioRxin preprint. (Also cited catalog# SPR-332, SPR-324 & SPR-484)

● 人 Alpha 突触核蛋白单体 (1型), 目录号 SPR-321

1. Deciphering the role of hsp110 chaperones in diseases of protein misfolding. Yakubu, U. M. (2021) PhD Thesis, University of Texas.

2. Suppression of aggregate and amyloid formation by a novel intrinsically disordered region in metazoan Hsp110 chaperones. Yakubu, U.M., Morano, K.A. (2021) J Biol Chem Jan-Jun 2021;296:100567.

● 人 Alpha 突触核蛋白寡聚体 (动态学稳定的), 目录号 SPR-484

1. LRP1 is a neuronal receptor for α-synuclein uptake and spread. Chen, K. et al. (2022) Molecular Neurodegeneration 17(1):57.

其他相关产品:  StressMarq的 Alpha 突触核蛋白抗体

总 结

● 多种α突触核蛋白聚集体可诱发疾病

● StressMarq 研发了一系列 α 突触核蛋白，包括： 两种类型的人源 α 突触核蛋白 PFF； A53T 突变型原纤维； N-乙酰化原纤维；小鼠和大鼠 PFF；未成熟的原纤维；动态学稳定的寡聚体；盐酸多巴胺稳定的寡聚体、EGCG 稳定寡聚体、tau 和 α 突触核蛋白共聚集体原纤维

● 一些 PFF 由相同的起始单体原料制成，在 EM 下看起来形态相似，但它们是在不同的条件下聚集生产的PFF

● 不同的α突触核蛋白形式具有明显不同的神经元和生理活性

● 单体、寡聚体、原纤维和纤丝α突触核蛋白都与帕金森病有关.

● StressMarq 提供各种工具用于突触核蛋白病研究

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